蜘蛛女王是游戏中的巨兽生物，当蜘蛛巢升级为三级的时候，蜘蛛女王就会从中产生，之后会根据自身范围内的巢穴数量，选择留下巢穴孕育出第二个蜘蛛女王，也可能会是消耗掉多出的巢穴。蜘蛛女王有着2500的血量，基础伤害为80，在其附近还会受到较高的减san光环，与之战斗最好带上蜂王冠来抵消减san的负面影响。
蜘蛛女王产出蜘蛛的速度也是非常快的，在常规状态下每十秒产出一只普通蜘蛛，战斗状态则是有着一定概率产出护士蜘蛛和蜘蛛战士，跟随的蜘蛛最多能达到16只，玩家靠近时这些小蜘蛛也是会自动攻击玩家，逃离到脱战范围后蜘蛛还会回到女王身边。如果周边存在多个蜘蛛可攻击的目标，他们的主要仇恨目标则是根据女王所决定的，女王生成后如果没有尽快击杀，在1.5天之后就会钻到地底并变回一级蜘蛛巢。
蜘蛛女王与普通蜘蛛的习性相反，在夜晚她会进入睡眠，白天才会开始行动，将其击杀是可以掉落四个怪物肉和蛛网，其中蜘蛛帽是击杀掉落的最关键物品。将其穿戴在头部装备栏，可以让周围的蜘蛛跟随玩家，并协助战斗，这项功能对于蜘蛛女王和她召唤出来的蜘蛛是无法生效。与蜘蛛女王进行战斗，应当先击杀她周围的小蜘蛛，这种情况下女王也不会产生仇恨，之后只剩下蜘蛛女王一人时就可以一对一对抗。
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